Sisältö
Gram-tahra tai yksinkertaisesti gramma on nopea ja yksinkertainen tekniikka, jonka tarkoituksena on erottaa bakteerit soluseinän ominaisuuksien mukaan altistettuaan erilaisille väriaineille ja liuoksille.
Gram-värjäyksellä on siten mahdollista tarkistaa bakteerien muodon lisäksi myös niiden saama väri, ja tämä tulos on tärkeä määriteltäessä muita strategioita bakteerilajin tunnistamiseksi ja lääkärin osoittamaan ennaltaehkäisevää hoitoa mikroskooppisesti havaitut ominaisuudet.
Gram-värjäys tehdään yleensä rutiininomaisesti laboratoriossa ja on osa bakterioskopiatutkimusta. Ymmärrä, mikä on bakterioskopia ja miten se tehdään.
Kuinka Gram-tahra tehdään
Gram-tahra on nopea, käytännöllinen ja edullinen tapa tunnistaa infektioista vastuussa olevat bakteerit, ja se on hyödyllinen lääkäreille osoittaakseen ehkäisevän hoidon infektiolle, joka saattaa esiintyä, koska näiden bakteeriryhmien erityispiirteet tunnetaan,
Gram-värjäys tehdään 7 päävaiheessa, mutta menetelmä voi vaihdella laboratoriosta riippuen:
- Aseta joitain bakteeripesäkkeitä objektilasille lisäämällä pisara vettä pesäkkeiden homogenoitumisen helpottamiseksi;
- Anna sen kuivua vähän, ja terä voi kulkea nopeasti liekin läpi kuivumisen edistämiseksi, mutta on kuitenkin tärkeää kiinnittää huomiota lämpötilaan, koska jos lämpötila on liian korkea, on mahdollista, että bakteerien rakenteessa tapahtuu muutos, joka voi häiritä tulosta koe;
- Kun aluslasi on kuiva, peitä se violetilla kristallivärillä ja anna sen vaikuttaa noin minuutin ajan;
- Pese lasilevy juoksevalla vesivirralla ja peitä aluslasilla lugoli, jonka tarkoituksena on kiinnittää sininen väriaine, ja anna sen vaikuttaa 1 minuutin ajan. Molemmat bakteerityypit voivat absorboida väriaineen ja lugolin muodostaman kompleksin muuttumalla siniseksi;
- Pese sitten objektilasi juoksevalla vedellä ja levitä 95-prosenttista alkoholia antamalla sen vaikuttaa 30 sekuntia. Alkoholi on vastuussa gram-negatiivisten bakteerien muodostavan lipidikalvon liuottamisesta ja siten väriaineen ja lugolin väliin muodostuneen kompleksin poistamisesta ja näiden bakteerien värjäytymisestä. Grampositiivisten bakteerien tapauksessa alkoholi dehydratoi grampositiivisten bakteerien soluseinän, jolloin huokoset supistuvat ja tekevät niistä läpäisemättömiä;
- Pese sitten uudelleen juoksevassa vedessä ja peitä lasilevy toisella väriaineella, fuksiinilla tai safraniinilla ja anna sen vaikuttaa 30 sekuntia;
- Pese sitten lasilevy juoksevan veden alla ja anna kuivua huoneenlämmössä.
Heti kun aluslasi on kuiva, on mahdollista laittaa tippa upotusöljyä ja tarkkailla lasia mikroskoopin alla 100-kertaisella objektiivilla, jolloin on mahdollista tarkistaa bakteerien läsnäolo tai puuttuminen sekä hiivojen ja epiteelisolujen läsnäolo.
Mitä varten se on
Gram-värjäyksen päätavoitteena on erottaa bakteerit soluseinän ominaisuuksien ja yleisen morfologian mukaan. Siten bakteerit voidaan luokitella mikroskoopilla havaittujen ominaisuuksien mukaan:
- Grampositiiviset bakteerit, jotka visualisoidaan sinisellä värillä johtuen siitä, että alkoholi ei muuta niiden väriä, koska niillä on paksumpi soluseinä ja huokoset supistuvat, kun ne altistuvat lugolille;
- Gramnegatiiviset bakteerit, jotka visualisoidaan vaaleanpunaisella / violetilla värillä johtuen siitä, että alkoholi värjää ne ja safraniini tai fuksiini värjää ne.
Kun bakteerit on tarkastettu mikroskoopilla, on mahdollista, että laboratoriossa suoritetaan lisätestejä bakteerilajin tunnistamiseksi. Grammin ja yhteyden kautta henkilön esittämiin oireisiin lääkäri voi kuitenkin osoittaa ennaltaehkäisevän hoidon, kunnes tarkempien kokeiden tulos on käytettävissä, koska tällä tavoin on mahdollista vähentää bakteerien replikaatiota ja estää komplikaatioita.